WHO:n tilastojen mukaan viimeisten 40 vuoden aikana 25 miljoonaa ihmistä on kuollut AIDSiin. Tämän infektion aiheuttamat vahingot ovat v altavat. Suurin osa tartunnan saaneista osoittautui Afrikassa, josta tämä tartunta oli peräisin. HIV:n kanssa taudin diagnosoinnista tulee erityisen tärkeä. Tosin HIV:hen ei ole vielä parannuskeinoa, mutta varhainen hoito voi pidentää potilaan elämää ja parantaa sen laatua.
HIV-infektion diagnoosi
HIV-infektio määritetään eri vaiheissa seuraavilla menetelmillä:
- ELISA - entsyymi-immunomääritys.
- Western blot.
- PCR - polymeraasiketjureaktio.
- Pikatestit.
PCR-menetelmän kehitti amerikkalainen biokemisti Kary Mullis, joka sai siitä Nobel-palkinnon vuonna 1983. Nykyään tätä lääketieteen menetelmää kaikkien infektioiden diagnosoinnissa pidetään johtavana sen tarkkuuden ja tietosisällön vuoksi. HIV ei ole poikkeus tässä suhteessa.
Analysoinnin ydin
Jokainen elävä solu sisältää RNA:ta ja DNA:ta. Nämä nukleiinihapot pystyvät kopioimaan ja replikoitumaan itsestään. Jokaisen infektion DNA-fragmentit ovat ainutlaatuisia. ATbiologisissa nesteissä nämä nukleiinihappofragmentit kiertävät. Ne vangitaan ja tunnistetaan erikoislaitteistolla - reaktorilla. Tämä on menetelmän perusta. Laboratorioassistentti laskee nämä palaset. Retroviruksen HIV:stä seurataan RNA:ta. PCR voi havaita ja laskea ne jopa yksittäisillä viruspartikkeleilla.
Laskimoverta käytetään useimmiten testinesteenä. Menetelmän erityiskomponentit sitoutuvat viruspartikkeleihin ja tekevät niistä havaittavissa, koska löydetyt fragmentit moninkertaistuvat.
HI-viruksen tapauksessa tulos viruksen esiintymisestä voidaan saada kauan ennen klinikan ilmestymistä. Siksi PCR:llä on korkean herkkyytensä vuoksi niin korkea diagnostinen arvo. V altava plussa PCR:stä on menetelmän monipuolisuus. Infektion inkubaatioaika PCR:lle ei ole este.
Tutkimuskustannukset
PCR-menetelmä on melko kallis. Tämä on yksi sen suurimmista haitoista. Se vaatii uusimmat laitteet ja korkeasti koulutettujen laboratorioassistenttien. Edellä esitetyn perusteella PCR-diagnostiikkaa ei tehdä pienillä paikkakunnilla. Voit päästä testaamaan vain erikoistuneissa suurissa klinikoissa.
HIV-DNA-testauksen hinta Moskovan klinikoilla alkaa 2 800 ruplasta, viruskuorma (viruksen RNA plasmassa) määritetään PCR:llä - 8 800 ruplasta ja HIV-resistenssi proteaasinestäjille - 16 500 ruplasta. Kuten näette, hinnat ovat melko korkeat. PCR voidaan tehdä maksutta julkisilla klinikoilla MHI-politiikan mukaisesti. Tärkeä,että menettely voidaan suorittaa nimettömänä. Potilas saa rekisteriin numeron, jonka avulla hän voi saada selville tuloksen. Nykyaikaisissa terveyskeskuksissa on asiakkaiden henkilökohtaisia tilejä, joille nämä tiedot syötetään.
Tutkimuksen tavoitteet
HIV:n PCR-diagnostiikkaa määrätään seuraavissa tapauksissa:
- tartunnan havaitseminen sairaalle äidille tai sen kantajalle syntyneellä lapsella kohdunsisäisen infektion määrittämiseksi.
- Jos ELISA antoi kyseenalaisia tuloksia (HIV:n PCR auttaa tässä tapauksessa lopullisen diagnoosin tekemisessä).
- Viruksen kvantitatiivisen sisällön havaitsemiseksi kehossa.
- Positiivisella immunoblotilla ne täydentävät toisiaan PCR:llä.
- Testataan luovuttajia.
- HI-viruksen varhaiseen diagnosointiin.
- Tehon ja ART-resistenssin määrittämiseksi.
Tämän analyysin etuna on, että HIV:n PCR voidaan suorittaa jopa alle vuoden ikäisille lapsille.
Tutkimusta ei usein tehdä ensisijaista diagnoosia varten, vaan jo hoitovaiheessa. Ensisijainen diagnostiikka on serologisia tutkimuksia (ne määrittävät HIV-vasta-aineiden tason). Jos väärä positiivinen tulos toistuu, tämä voi johtua alhaisesta viruskuormasta.
PCR diagnosoi HIV:n, kun sille ei vielä ole vasta-aineita. ELISA-menetelmä ei tässä tapauksessa anna vastausta.
Ja HIV:n PCR on jo positiivinen. Mutta tämän HIV-jakson oireet ovat epäspesifisiä. Yleislääkäri hoitaa potilasta ensin pitkään ja tuloksetta ARVI:n vuoksi. On syytä muistaa, että HIV-diagnoosi perustuu vainPCR:ää ei ole asetettu, on läpäistävä muut kattavat testit. PCR-menetelmä on useammin apuväline vaikeissa tapauksissa.
Valmistautuminen analyysiin
Ennen kuin otat HIV:n PCR:n, 2 päivää ennen testiä, älä syö rasvaisia ruokia, alkoholia. On myös parempi olla rasittamatta henkisesti ja fyysisesti. Jos potilaalle määrätään immunostimulaatiohoito, se keskeytetään 2 viikkoa ennen analyysiä.
Veri otetaan parhaiten aamulla. Myös muut elimistön biologiset nesteet (siittiöt, emättimen erite) voidaan tutkia, mutta veri on paras materiaali. Sylkeä, hikeä, virtsaa ja kyyneleitä ei käytetä, koska niiden viruspitoisuus on minimaalinen.
PCR:n plussat HIV:lle
Menetelmän etuja ovat äärimmäisen pieni väärän positiivisen tuloksen todennäköisyys, reaktion universaalisuus elimistön biologisille nesteille. Analyysilla on laaja valikoima:
- Yhdellä verinäytteellä voidaan havaita erilaisia infektioita.
- Tekniikka on kiireellinen, tulos on valmis heti seuraavana päivänä.
- Luottamus on 85-98 %.
- HIV:n esiintyminen voidaan määrittää 10-14 päivää tartunnan jälkeen (vasta-aineita ei ole vielä tällä hetkellä).
- Ei ikärajaa, voidaan suorittaa heti syntymästä lähtien.
Menetelmän haitat
PCR:n haitat ovat seuraavat:
- Analyysin kustannukset.
- Edellyttää kehittyneitä lääketieteellisiä laitteita.
- Edellyttää korkeasti koulutettua laboranttia ja lääkäriä,ottaja-analyysi.
- Reaktio on erittäin herkkä, joten virhe voi olla 20%.
- Voi aiheuttaa väärän positiivisen tuloksen, jos potilaalla on autoimmuuniprosesseja, onkologiaa tai kroonisia infektioita.
- Laboratoriotilojen erityinen puhtaus on tarpeen, koska virus voi päästä analyysiin ilmasta. Silloin tulos on väärä.
PCR:ää suorittaville laboratorioille on kehitetty erityisiä tiukkoja toimenpiteitä sisäisen valvonnan SanPiN-järjestelmän mukaisesti diagnostiikan laadun parantamiseksi. Lisäksi kaikkia tällä tekniikalla työskentelysääntöjä on noudatettava:
- Vaaditaan tiukasti koeputkien ohjeita.
- Katso uudelleen ennen verinäytteen ottoa ja varmista, että analyysi on ajoitettu.
- Sairaanhoitajan tulee merkitä putket oikein.
- Laboratorion on suoritettava kaikki biomateriaalin käsittelyt oikein ristikontaminaation estämiseksi.
- Testijärjestelmän on oltava erinomainen laatu.
Vain jos kaikki nämä ehdot täyttyvät, virhe vastauksessa voi olla vain noin 2 % jaksoista.
Analyysin kesto
Monet ovat kiinnostuneita siitä, kuinka kauan HIV:n PCR on valmis. Diagnoosi kestää enintään 8 tuntia. Potilas voi saada vastauksen jo seuraavana päivänä. Pikatestaus suoritetaan 2 tunnin sisällä.
PCR:n luotettavuus
PCR:ää ei pidetä ihanteellisena diagnoosimenetelmänä monista eduistaan huolimatta. Häneen ollaan yhteydessä asiassatarve saada seulontatestit HIV:n esiintymisen var alta elimistössä.
Milloin veri otetaan analyysiä varten?
Kuinka kauan kestää PCR:ää HIV:lle? Luotettava tulos voidaan saada jo verta otettaessa 4-4 päivää väitetyn tartunnan jälkeen. Kahden viikon kuluttua HIV:n luotettavuus on 98%, ja 5 päivän ajanjaksolla - 80%. HIV:n PCR:n negatiivisen tuloksen esiintyminen on luotettavaa, mutta ehdottoman tarkan tuloksen saamiseksi suoritetaan myös ELISA.
ELISA-analyysi on tehokas vain, jos virukselle on vasta-aineita. Tämä aika voi kestää 1-3 kuukaudesta kuuteen kuukauteen. Koska ELISA antaa suuremman todennäköisyyden (98 % -99,9 %), PCR:ää ei voida kutsua 100 % varmistustestiksi HIV-infektion toteamiseksi. Mutta toisa alta tämä on ainoa tekniikka, jossa sinun ei tarvitse odottaa vasta-aineiden ilmaantumista.
HIV:n kohdalla PCR voi antaa tietoa ART:n tehokkuudesta, HIV-taudin vaiheesta ja VN:ien määrästä (kvantitatiivinen arvio HIV:n esiintymisestä kehossa). Tämä kertoo muutoksen vakavuudesta ja laajuudesta.
HIV-PCR-testaus on tarpeen myös, jos veressä on vasta-aineita, mutta niiden esiintyminen ei osoita HIV-infektion luotettavuutta kliinisesti.
Niitä ei testata vain infektioiden ja satunnaisen seksin var alta. Muut tilaisuudet:
- Rakakauden suunnittelu.
- Tuleva toiminta.
- Satunnainen seksi.
- Jotkin ammatit vaativat tämän kokeen työhönpääsyyn (opettajat, lääkärit ja muu lääkintähenkilöstö).
- vangit.
- TB-potilaat.
- Hätätilanneministeriön ja poliisin työntekijät.
- Palautettu lom alta eksoottisista maista (jos haluat varmistaa, ettei tule tartuntaa).
- Prostituoidut.
- Ulkomaalaiset opiskelijat.
- Huumeet.
Myös tietyt potilaan oireet voivat pakottaa HIV-testin:
- Äkillinen laihtuminen.
- yli 3 viikkoa kestävä ripuli
- Kohtuuttoman korkea lämpötila pitkään aikaan.
- Turvonneet imusolmukkeet.
- Selittämätön syy keuhkokuumeeseen, kandidiaasiin jne.
Analyysin tulkitseminen on hoitavan lääkärin, ei laborantin, etuoikeus.
PCR vai ELISA, kumpi on parempi?
Kun HIV-viruksen RNA:n PCR-diagnoosi havaitaan sekä kvalitatiivisesti että kvantitatiivisesti. Tämä analyysi tunnistaa selvästi tietyn patogeenin, vaikka ristiin reagoivia patogeenejä olisi useita. Biologista materiaalia voidaan käyttää myös kuivatussa muodossa. Huonona puolena on PCR:n korkea herkkyys, jolloin väärän positiivisen tuloksen voi saada jopa pieni määrä vierasta DNA:ta instrumenteissa tai koeputkessa.
ELISA:n tehtävä ja mahdollisuus on määrittää retroviruksen vasta-aineiden esiintyminen. Vaikka sen tarkkuus on 99 %, sitä ei voida soveltaa alkuvaiheessa.
Laadullinen HIV-testaus
Laadukas HIV:n PCR määrittää viruksen esiintymisen kehossa. Tulokset näyttävät tässä tapauksessa tältä: positiivinen, väärä positiivinen, negatiivinen. Mutta tämä tutkimus ei anna tietoa retroviruksen määrästä. Tällainen laadullinen analyysisopimatonta, kun HIV-infektio on jo todettu elimistössä muilla tavoilla.
Hoidon tehokkuutta on mahdotonta valvoa korkealaatuisella PCR:llä.
HIV-määrän määritys
Ainoastaan HIV-tartunnan saaneet ihmiset, jotta voidaan laskea viruksen RNA-kopioiden lukumäärä biologisessa tuotteessa.
Tällaisen tutkimuksen tarkoituksena on seurata meneillään olevaa hoitoa ja tunnistaa viruksen vastustuskyky sille. Lääkäri ei ole sokeasti määrännyt viruslääkehoitoa tällaisissa laskelmissa, joten se on tehokkaampaa. HIV-infektion kvantitatiivinen PCR tehdään paljon useammin. Tämä analyysi näytetään kopiona/ml verta.
Mitä tuloksia voidaan antaa:
- Virus-RNA puuttuu tai on hyvin pieni (noin 20 kopiota/ml). Ei varmuutta diagnoosista.
- 20 - 10 - 6. asteen kopiota / ml - diagnoosi on luotettava.
- Yli 106 kopiota/ml - korkea VN.
Laboratoriot voivat suorittaa reaaliaikaisia PCR-testejä HIV:n var alta. Tämä edellyttää PCR-tuotteiden kertymisen havainnointia ja numeerista arviointia tulosten automaattisen tallentamisen avulla.
